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微流控流式細胞儀如何實現(xiàn)細胞分選與下游分析功能集成?

更新時間:2025-11-12點擊次數(shù):93
  微流控流式細胞儀通過將微流控技術與流式細胞術相結合,實現(xiàn)了細胞分選與下游分析功能的高度集成,其核心原理與實現(xiàn)方式如下:
  一、核心原理:微尺度下的精準操控
  微流控流式細胞儀利用微米級通道(1-1000μm)實現(xiàn)流體的精準操控,結合流式細胞術的熒光檢測與分選能力,形成“檢測-分選-分析”一體化流程。其關鍵技術包括:
  層流控制:微通道內(nèi)流體呈層流狀態(tài)(雷諾數(shù)Re<1),細胞運動軌跡穩(wěn)定可預測,避免傳統(tǒng)方法中的湍流干擾。
  熒光激活分選(FACS):通過熒光標記細胞表面抗原或內(nèi)部物質(zhì),激光激發(fā)后產(chǎn)生散射光和熒光信號,經(jīng)光電倍增管轉換為電信號,計算機處理后識別目標細胞。
  物理分選機制:利用細胞大小、密度、彈性等物理特性,通過微柱陣列、慣性聚焦、聲表面波(SAW)等技術實現(xiàn)無標記分選。
  二、功能集成:從分選到分析的全流程
  樣本預處理與進樣
  微流控芯片集成樣本過濾、稀釋等功能模塊,細胞懸液經(jīng)鞘流包裹后形成單列流,通過高壓或電動力驅動進入檢測區(qū)域。
  高通量檢測與分選
  熒光檢測:激光束垂直照射細胞流,散射光反映細胞體積,熒光信號強度代表抗原或核內(nèi)物質(zhì)濃度。
  分選執(zhí)行:根據(jù)檢測結果,通過電場、光鑷、PDMS微閥或相變閥等控制細胞流向。例如,電場切換可使帶電細胞偏轉至不同收集池;光鑷技術通過激光捕獲與移動實現(xiàn)微米級精確定位。
  下游分析集成
  實時形變分析:集成高速成像模塊,實時拍攝細胞形變、亮度、尺寸等參數(shù),結合熒光信號進行多維度分析。
  封閉式操作:樣本從進樣到分析全程封閉,減少污染與操作誤差,提升數(shù)據(jù)可靠性。
  三、技術優(yōu)勢:高效、精準、低成本
  高通量處理:陣列式并行通道設計支持每小時處理超50個樣本,分選10?個細胞僅需10分鐘。
  高純度與回收率:分離純度達95%-99.9%,回收率超90%,細胞活性保留率超95%。
  低成本與易用性:芯片批量生產(chǎn)降低單次分離成本(為傳統(tǒng)方法的1/5-1/10),自動化操作減少人工誤差,適合工業(yè)級細胞制備。
  四、應用場景
  循環(huán)腫瘤細胞(CTCs)檢測:通過DLD技術分選直徑20μm的CTCs,純度達99%以上。
  免疫細胞治療:分選高活性CD8?T細胞,縮短擴增周期2-3天,降低培養(yǎng)成本。
  干細胞研究:高效處理微量活檢樣本,避免因樣本量不足導致的實驗失敗。

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